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沙眼衣原體感染的實驗室診斷

更新時間:2019-07-14 15:32:27  推薦指數(shù):

  沙眼衣原體(chlamydia trachomatis,CT)是近年來最常見的性傳播疾病病原體之一,男性和女性均可感染,并可導(dǎo)致嚴(yán)重的后遺癥,如女性宮外孕、輸卵管性不孕以及男性不育等。生殖道沙眼衣原體感染是人類免疫缺陷病毒(HIV)感染的協(xié)同因素。最新研究報道它還是罹患宮頸癌的危險因素。

  一、沙眼衣原體的流行概況

  據(jù)統(tǒng)計,美國每年大約有400萬新感染病例,整個歐洲的新感染病例數(shù)已達(dá)到每年1000萬,全球每年檢出的新感染沙眼衣原體病例數(shù)約為8900萬。由Parish等人于1999~2000年在中國所做的一項流行病學(xué)研究顯示,一般女性生殖道CT感染率為2.6% ,一般男性生殖道CT感染率為2.1%;而北京大學(xué)第一醫(yī)院婦產(chǎn)科的研究顯示,北京地區(qū)正常婦女宮頸衣原體的感染率高達(dá)13.4%。美國每年用于治療沙眼衣原體感染及其并發(fā)癥的費用約3O億~4O億美元。在英國,每年用于治療此病的成本至少是5000萬英鎊。

  由于50%男性和75%女性感染后表現(xiàn)為無癥狀感染,故絕大多數(shù)感染者是通過篩查發(fā)現(xiàn)。生殖道沙眼衣原體感染會造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān),大部分費用是治療女性感染者,尤其是有后遺癥的女性,主要是慢性盆腔疾病。據(jù)估計治療女性感染者的費用占治療衣原體感染總費用的80%。

  二、沙眼衣原體篩查的必要性和可行性

  生殖道沙眼衣原體感染的篩查是用實驗室診斷試驗對有篩查指征的人群進(jìn)行檢測,盡早發(fā)現(xiàn)感染者或無癥狀感染者,及時給予確診和處理,以控制進(jìn)一步的傳播,減少發(fā)生后遺癥的可能性。

  通常約有1/2~1/3的沙眼衣原體感染者無任何自覺癥狀,如果得不到有效的洽療,感染可持續(xù)1年甚至數(shù)年。在此期間可發(fā)生盆腔炎和輸卵管狹窄等并發(fā)癥。此外,無癥狀的感染者可作為傳染源將病原體傳染給性伴侶。沙眼衣原體感染的高流行率和眾多嚴(yán)重的并發(fā)癥可帶來高額治療成本,從而使它成為嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題。但該病自然史清楚,可以通過早期診斷和用有效治療藥物治愈。因此,在人群中,尤其是在無癥狀的性活躍期婦女中,開展沙眼衣原體篩查具有可行性和必要性。早在60年代歐美等發(fā)達(dá)國家就已經(jīng)將沙眼衣原體作為一種獨立的性傳播疾病開展篩查和監(jiān)測。我國衛(wèi)生部于2007年頒布《全國性病監(jiān)測點監(jiān)測方案》,新增加了生殖道CT感染作為單獨監(jiān)測的病種。

  三、篩查人群和指征:

   篩查人群主要是針對高危人群,由于不同國家不同文化背景的差異,危險因素也會改變。美國預(yù)防服務(wù)特別工作組于2007年7月發(fā)表了衣原體感染篩查指南(Ann Intern Med,2007,147:128)。該指南需要進(jìn)行沙眼衣原體(Chlamydia trachomatis)篩查的人群:(1)未孕婦女:年齡<24歲且有性能力;>25歲、有性能力、而且處于STDs危險(即有衣原體感染史或其他性傳播疾病史、有新的或多個性伴侶、未堅持采取防護(hù)措施的職業(yè)性工作者)。(2)孕婦:年齡<24歲;年齡>25歲且患STDs風(fēng)險較大。(3)男性:因證據(jù)不足而未給出建議,盡管其沙眼衣原體感染率與女性相似。但通過考察后發(fā)現(xiàn),盡管對男性進(jìn)行衣原體感染的篩查和治療所獲得的直接效益相對較小,但女性卻可從中受益,因此考慮到其社會效益可能會對該條建議進(jìn)行修正。

  研究發(fā)現(xiàn),在STD門診、計劃生育門診、流產(chǎn)門診和青少年健康門診,沙眼衣原體的感染率在10%~12%,高于不育門診,這與到不育門診就診者年齡偏大有關(guān)。在上述感染率較高的門診可選擇普遍性篩查,即對所有的女性或男性就診者都進(jìn)行篩查。而對不育門診等感染率較低場所使用選擇性篩查,即針對有危險因素的女性進(jìn)行篩查。

  四、沙眼衣原體的篩查和確認(rèn)方法

  生殖道沙眼衣原體的特異性檢查試驗有3類方法:

 ?、偌?xì)胞培養(yǎng);②抗原檢測,如直接免疫熒光法、酶免疫測定(EIA)、快速免疫層析法等;③核酸檢測,包括核酸探針法和DNA/RNA擴增。

  目前沒有任何一種方法可以避免假陽性或假陰性結(jié)果的出現(xiàn)。無論我們在采樣、處理上怎樣仔細(xì)小心,無論我們在檢測方法和設(shè)備上如何改進(jìn),無論我們對一份樣本進(jìn)行多少種不同方法的檢測,我們都只能接近真實的結(jié)果。假陽性和假陰性是必定存在的,但我們可以想辦法減少它

  為了對患者負(fù)責(zé),避免患者不必要的經(jīng)濟(jì)和心理負(fù)擔(dān),避免抗生素的濫用,美國CDC推薦所有除細(xì)胞培養(yǎng)法之外的試驗陽性結(jié)果都要用其他檢測方法

  作確認(rèn)試驗。因此,在國外衣原體的實驗室診斷分為篩查和確認(rèn)兩部分。目前國外使用的衣原體篩查方法主要有EIA法和快速金標(biāo)法。衣原體確認(rèn)實驗方法有DNA擴增實驗(包括PCR)、DFA實驗、IFA實驗和培養(yǎng)法。

  1、涂片直接鏡檢:主要用于眼部標(biāo)本,診斷沙眼,姬姆薩染色后在上皮細(xì)胞內(nèi)查找包涵體。

  2、抗原檢測:①直接免疫熒光抗體檢測法。②酶聯(lián)免疫吸附試驗。這兩種方法均有快速、簡單、敏感性高的優(yōu)點,廣泛應(yīng)用于新近感染的臨床診斷。缺點是死菌也可被檢測到,易出現(xiàn)假陽性。

  3、細(xì)胞培養(yǎng):此法操縱復(fù)雜,操縱條件要求高,但是檢測衣原體的“金標(biāo)準(zhǔn)”。

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